人白介素28A(IL-28A)是一種重要的細(xì)胞因子,屬于干擾素家族,主要參與免疫反應(yīng)。ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)試劑盒則是用于檢測和定量IL-28A的常用工具。
1.免疫調(diào)節(jié)
IL-28A在免疫應(yīng)答中具有多重作用,包括:
-抗病毒活性:能夠增強(qiáng)宿主細(xì)胞對(duì)病毒的抵抗力,誘導(dǎo)干擾素響應(yīng)及抗病毒基因的表達(dá)。
-調(diào)節(jié)B細(xì)胞和T細(xì)胞的活化:IL-28A促進(jìn)B細(xì)胞的分化,并增強(qiáng)特異性T細(xì)胞的應(yīng)答,提高機(jī)體對(duì)病原的免疫記憶。
2.臨床相關(guān)性
研究表明,在多種疾病,尤其是病毒性肝炎和某些類型的癌癥中發(fā)揮重要作用,因此其濃度的檢測能夠?yàn)榕R床提供寶貴的信息。IL-28A的水平與病毒負(fù)荷、疾病的嚴(yán)重程度等均有關(guān)聯(lián)。
ELISA的原理:
1.包被抗原:將待測的抗原(如IL-28A)固定在微孔板的底部。
2.加入樣品:將待測樣品(如血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清液)添加到微孔中,樣品中的IL-28A與固定的抗原結(jié)合。
3.加入酶標(biāo)記的抗體:加入特異性抗IL-28A的抗體,該抗體與IL-28A結(jié)合,并通過酶標(biāo)記增強(qiáng)信號(hào)。
4.底物反應(yīng):加入底物,酶與底物反應(yīng)生成可測量的顏色反應(yīng),反應(yīng)的強(qiáng)度與樣品中IL-28A的濃度成正比。
5.數(shù)據(jù)分析:使用分光光度計(jì)測量各孔的吸光度值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中IL-28A的濃度。
人白介素28Aelisa試劑盒的組成:
1.微孔板:用于樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液的加入。
2.標(biāo)準(zhǔn)品:已知濃度的IL-28A,用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
3.樣品稀釋液:用于稀釋待測樣品,以確保其濃度在檢測范圍內(nèi)。
4.酶標(biāo)記抗體:特異性結(jié)合IL-28A的抗體,通常標(biāo)記有HRP(辣根過氧化物酶)。
5.底物液:用于酶反應(yīng)的底物,通常為TMB(四甲基聯(lián)苯胺)。
6.終止液:用于停止反應(yīng),使吸光度值穩(wěn)定。
7.說明書:詳細(xì)的操作步驟及注意事項(xiàng)。